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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino
 
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產(chǎn)品名稱:
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino
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小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino相關(guān)產(chǎn)品:
1,1,1-三氯三氟乙烷
(標準品)1,1,1-三羥甲基烷1,1,2,2-四氯乙烷
拉寧(標準品)1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷1,1,2-三氯三氟乙烷
  小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino的詳細資料:

細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 3T3細胞株是1962年TodaroG和GreenH從分離的瑞士小鼠胚胎中建立的;該細胞的生長受接觸性抑制,匯合狀態(tài)的單層細胞密度為40000個細胞/平方厘米;檢測結(jié)果顯示該細胞鼠痘病毒陰性;在塑料瓶中生長較好,在某些玻璃表面上可能狀態(tài)不佳;細胞生長飽和時其密度可以達到約50000cells/cm2。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代;3~4天1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino

貼壁生長

EY-X63212

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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
大鼠垂體瘤細胞;GH3形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 疏松貼壁,有漂浮的細胞簇Human IFN-γ ELISA KIT

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Rat NGAL ELISA KIT

二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Rat IL-17 ELISA KIT

小鼠垂體瘤細胞;GT1-1形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Boviene IL-1β ELISA Kit

人前列腺癌細胞;DU145[DU145;DU-145]形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human Insulin ELISA KIT

人胚腎細胞;293[HEK-293]形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human IL-10 ELISA KIT

人肺癌細胞;A549[A-549]形態(tài)特性: 上皮樣;多角形生長特性: 貼壁生長Human TGF-β 1 ELISA KIT

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Human C-Reactive Protein ELISA KIT

人乳腺癌細胞;MCF7形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Rat MIP-1α ELISA KIT

人細胞;HeLa形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human IL-1F9 ELISA KIT

人乳腺癌細胞;MDA-MB-453形態(tài)特性: 上皮樣;多角形生長特性: 貼壁生長Rat IgG(Total) ELISA KIT

小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞;NG108-15[108CC15]形態(tài)特性: 扁平;圓形;直徑10~100mm生長特性: 貼壁生長Rat SCF ELISA KIT

小鼠畸胎瘤細胞;P19形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Rat MIP-2 ELISA KIT

人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;NTERA-2形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human IL-18 ELISA KIT

人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Rat IL-10 ELISA KIT

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Mouse IL-12p40 ELISA KIT
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒11-DH-TXB2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒12-HETEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒15-LO/LOXELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒15-LO/LOXELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒15-LO/LOXELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒16-αOHE-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒16-αOHE-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒17-KSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-Swissalbino
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