榧子染料法PCR鑒定試劑盒反應(yīng)五大要素
點擊次數(shù)：759 更新時間：2021-02-24
榧子染料法PCR鑒定試劑盒反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
絲狀支原體絲狀亞種型PCR檢測試劑盒多少錢 Mycoplasma mycoides subsp(mycoides SC)SCPCR
絲狀支原體山羊亞種PCR定量試劑盒 Mycoplasma mycoidessubsp(capri)PCR
口腔支原體PCR試劑盒哪家代理 Mycoplasma oralePCR
支原體通用PCR試劑盒價格 Mycoplasma spp.PCR
滑液支原體PCR試劉盒 Mycoplasma synoviaePCR
腦粘體蟲PCR進(jìn)口試劑盒 Myxosoma cerebralisPCR
黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒多少錢 Myxosporidia spp.PCR
納氏蟲屬通用·PCR定量試劑盒 Naegleria spp.·PCR
內(nèi)羅畢羊病病毒PCR試劑盒哪家代理 Nairobi Sheep Disease Virus(NSDV)RTPCR
恩杜姆病毒PCR試劑盒價格 Ndumu VirusRTPCR
肝胰腺壞死性細(xì)菌PCR試劉盒 Necrotizing Hepatopancreatitis BacteriumPCR
淋病奈瑟菌PCR進(jìn)口試劑盒 Neisseria gonorrhoeaePCR
腦膜炎奈瑟菌PCR定量試劑盒 Neisseria meningitidisPCR
上一篇 小鼠胎盤生長因子（PLGF）ELISA試劑盒的存放以及注意事項 下一篇 蜥蜴睪酮（T）ELISA試劑盒試劑盒使用注意說明
